熒光增白劑28(Fluorescent Brightener 28)，同義名Calcofluor White M2R，非特異性結(jié)合含β-1,3-連接或β-1,4-連接的多糖，比如幾丁質(zhì)，β-葡聚糖和纖維素，因此能夠用來(lái)標(biāo)記昆蟲的幾丁質(zhì)，植物的細(xì)胞壁。其最大的吸收波長(zhǎng)為365nm(UV，紫外激發(fā))，最大發(fā)射波長(zhǎng)為450nm。染色結(jié)果在熒光顯微鏡下發(fā)出藍(lán)色熒光。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果展示：

Fluorescent Brightener 28染色-蝗蟲皮層

實(shí)驗(yàn)流程：

　　1 組織切片脫蠟后，洗滌 5min/3次。

　　2 畫圈，配置Fluorescent Brightener 28工作液，工作液用PBS配置，濃度5毫克/毫升，室溫避光孵育10分鐘。

　　3 染核：玻片置于PBS(PH7.4)中在脫色搖床上避光晃動(dòng)洗滌3次，每次5min。切片稍甩干后滴加PI染液室溫避光染核8min,PI可將細(xì)胞核染成紅色(昆蟲標(biāo)本可以染核，植物標(biāo)本因?yàn)橥ǔＧ胁坏郊?xì)胞核，不需要染PI )

　　4 封片:玻片用PBS(PH7.4)洗滌，稍甩干后用抗熒光淬滅封片劑封片。

　　5 熒光顯微鏡觀察

送樣運(yùn)輸要求：

　　石蠟切片：常溫運(yùn)輸

　　冰凍切片：-20℃運(yùn)輸