1、爬片前期處理：

　　①爬片固定：在孔中滴加3ml固定液，固定15min。吸凈孔中固定液，純水水洗3次(每次水洗的時(shí)候用尖頭鑷子挑起爬片清洗，然后用吸管吸凈純水，β半乳糖染色使用專用的固定液。)

　　②爬片破膜：在孔中滴加3ml破膜液，破膜15min。吸凈孔中破膜液，純水水洗3次(每次水洗的時(shí)候用尖頭鑷子挑起爬片清洗，純水不吸出，留著后續(xù)使用)

　　(針對(duì)六孔板，其它孔板滴加適量的固定液和破膜液。)

　　2、爬片染色：

　　后續(xù)染色步驟同石蠟切片相同，染色時(shí)間適當(dāng)延長(zhǎng)，清洗或者更換染液使用巴氏吸管吸凈之前的染液。

　　3、爬片封片：

　　加入適量酒精或水(看染色過(guò)程中最后一步是使用水還是酒精)后挑起爬片，爬片靠在孔邊緣，吸凈酒精后放置于65℃烤箱烘干15min。(染色過(guò)程中注意細(xì)胞爬片的方向，保證細(xì)胞面朝上和染液充分接觸)

　　從烤箱中取出裝有爬片孔板，在載玻片上寫下每個(gè)孔板的編號(hào)，在載玻片上滴加一滴中性樹(shù)膠后，用鑷子夾起對(duì)應(yīng)編號(hào)的爬片，細(xì)胞面朝下封片。(封片過(guò)程中注意細(xì)胞爬片的方向，保證細(xì)胞面朝下封片)

二、其他細(xì)胞種類的涂片制備：

　　1.取細(xì)胞懸液，2800r 4℃離心5min，棄上清液，根據(jù)底部沉淀的細(xì)胞量加入2ml甲醇固定。若肉眼看不見(jiàn)細(xì)胞沉淀時(shí)，用3000r/min，4℃離心10min

　　2.取用甲醇重懸的細(xì)胞懸液，2800r 25℃離心5min，棄上清液，根據(jù)底部沉淀加入PBS：

　　①若肉眼看不見(jiàn)細(xì)胞沉淀時(shí)，用3000r/min，25℃離心10min，依然無(wú)沉淀時(shí)，留取底部約0.2ml的液體，再加入0.5ml的PBS混勻后用移液槍吸取200ul，滴于提前用組化筆畫好的小圓圈中(3cmX2cm的橢圓);

　　②若細(xì)胞沉淀量很少，綠豆大小時(shí)，棄上清，留取底部沉淀，加入0.5mlPBS,用移液槍吹打混勻后，吸取200ul，涂于提前用組化筆畫好的小圓圈中(3cmX2cm的橢圓);

　　③若細(xì)胞沉淀量很多，黃豆大小或更大時(shí)，棄上清，留取底部沉淀，加入2mlPBS,用移液槍吹打混勻后，吸取150ul，涂于提前用組化筆畫好的大圓圈中(最大長(zhǎng)邊約5cm，最大短邊約2cm的橢圓)，在顯微鏡下觀察細(xì)胞量的多少，若還是過(guò)厚，再用PBS對(duì)倍稀釋該細(xì)胞懸液，直至在顯微鏡下觀察到細(xì)胞量涂布均勻。

　　3.用槍將細(xì)胞懸液鋪滿整個(gè)圓圈，涂片放置自然晾干。